近日,湖北大學(xué)省部共建生物催化與酶工程國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室主任馬立新教授團(tuán)隊(duì)關(guān)于新冠病毒(SARS-CoV-2)創(chuàng)新檢測方法的研究成果“PfAgo-based detection of SARS-CoV-2(《基于PfAgo的新冠病毒核酸檢測》)發(fā)表于國際權(quán)威期刊《Biosensors and Bioelectronics》。
利用SARS-CoV-2 PAND系統(tǒng)檢測新冠核酸示意圖
2020年新冠病毒引起的新冠肺炎對全球人類的健康和生命安全帶來了巨大威脅。新冠病毒的傳播能力極強(qiáng),無癥狀潛伏感染者也成為了潛在傳染源,及時(shí)準(zhǔn)確地檢測出新冠感染者對保護(hù)公眾安全和控制疫情傳播具有重要的意義。理想的檢測方法需兼顧敏感性和特異性,速度快、費(fèi)用低,并能夠同時(shí)檢測多個(gè)靶標(biāo),在同樣的時(shí)間成本上進(jìn)一步提高準(zhǔn)確度。目前新冠病毒的檢測手段主要依賴RT-qPCR技術(shù),該技術(shù)在進(jìn)行大規(guī)模篩查的時(shí)候需要大批量昂貴的熒光定量PCR儀以及訓(xùn)練有素的專業(yè)檢測人員。在疫情爆發(fā)時(shí),由核酸檢測低陽性率引發(fā)的假陽性和假陰性會(huì)造成病情判斷錯(cuò)誤,因此尋求新的理想的核酸診斷方法迫在眉睫。
新冠疫情爆發(fā)初期,馬立新意識(shí)到核酸檢測對新冠疫情防控的重要性和現(xiàn)有檢測方法的局限性,憑借多年對核酸大分子和新型可編程核酸酶研究的經(jīng)驗(yàn),構(gòu)思設(shè)計(jì)全新的核酸檢測方法,并在復(fù)工后第一時(shí)間組織研究團(tuán)隊(duì)與湖北省疾控中心展開合作,開發(fā)出一種基于PfAgo的新冠核酸檢測方法:SARS-CoV-2 PAND。該方法能夠同時(shí)檢測N基因和ORF1ab基因,具有極高的靈敏度,能夠準(zhǔn)確檢測出樣本中低至1個(gè)拷貝的核酸分子;可在常規(guī)PCR儀中進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng),只需利用熒光定量PCR儀進(jìn)行熒光信號(hào)讀取,將熒光定量PCR儀的使用時(shí)間從90-120分鐘縮短至3-5分鐘,使得熒光定量PCR儀的利用效率提高了20倍以上。
此外,該方法還能夠有效地鑒定Spike蛋白突變的新冠病毒突變體(據(jù)報(bào)道,該突變體可能具有更強(qiáng)的傳染性)。這一新的檢測方法在檢驗(yàn)36個(gè)新冠病毒陽性和8個(gè)新冠病毒陰性樣本的實(shí)驗(yàn)中,特異性和準(zhǔn)確度達(dá)100%。基于PfAgo的新冠病毒創(chuàng)新檢測系統(tǒng)在控制由病毒引發(fā)的大規(guī)模傳染病流行方面具有巨大的潛力。(鮮文濤)
文章鏈接:https://doi.org/10.1016/j.bios.2020.112932
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